Différenciation I

Question 1

différenciation

Answer 1

acquisition par une cellule de caractères morphologiques originaux aboutissant à une spécialisation fonctionnelle

Question 2

mécanismes moléculaires de la différenciation

Answer 2

• nécessité de la ralentir la prolifération via des signaux reçus par la cellule
• signaux extérieurs émanant des cellules d’un même tissu ou d’un autre tissu
• arrêt du cycle cellulaire: arrêt en G1

expression ou repression de gènes spé au lignage permet la différenciation cellulaire

Question 3

≠ signaux pouvant induire la différentiation

Answer 3

• modif dans l’expression ou la répression de gènes spé
• induction par ∑ ligand-récepteur
• contacts directs entre cellules d’un même type
• intéractions entre cellules de ≠ feuillets primitifs: épithélium, mésenchyme

Question 4

intéraction L-R

Answer 4

certaines intéractions médiées par FdC ou les hormones et leurs récepteurs:

• R à tyrosine kinase
• hm liposolubles et R nucléaires: acide rétinoïque, hm stéroïdes, thyroxine
• R couplés aux prot G: acétylcholine, sérotonine

régulation génique par l’intermédiaire de ≠ voies de signalisation intracell

Question 5

intéractions c-c dans un même tissu

Answer 5

intervention des cadhérines ou caténines

Question 6

intéractions entre feuillets ≠ ou avec la MEC

Answer 6

médiées par ≠ types de molécules:

• GAG se lient aux prot pour former protéoglycanes
• prot fibreuses structurale → collagène et l’élastine ou prot d’adhérence → fibronectine ou laminine

Question 7

méthodes de reprogrammation

Answer 7

fusion cellulaire
utilisation d’extraits cellulaires
reprogrammation w/ FdT (Oct4, Sox2, myc, klf4)

Question 8

transdifférenciation

Answer 8

• changement irréversible d’une cellule différenciée en un autre type de cellule différenciée
• processus de dédifférenciation et de prolifération est un stade de transition nécessaire mais pas obligatoire dans tous les cas
• peut ê obtenue par ajout d’additif de culture (dexamethasone) / modification génétique de la cell d’origine (FdT Pdx1)

Question 9

transdifférenciation directe

Answer 9

capacité à reprogrammer une cellule somatique en une autre cellule somatique sans passer par une cellule pluripotente

Question 10

sources de CSM

Answer 10

moelle osseuse (63%)
tissu adipeux (10%)
gelée de Wharton (cordon ombilical 17% )
placenta (2%)

Question 11

CSM propriétes

Answer 11

auto renouvellement

différenciation: adipocyte, chondrocyte, ostéocyte (spé mésodermique)

Question 12

l’expansion avant la différenciation

Answer 12

échantillon biologique + bio réacteurs
→ milieu de culture + additifs:
- cytokines (IL2,4)
- FdC (GM-CSF, EPO...)
- aa
- suppléments: insuline, transferrine, sérum de veau, lysat plaquettaire

Question 13

ex d’additifs pour induire différenciation

Answer 13

1. Adipogenique
   milieu de culture = dexamethasone, insuline
   coloration = oil red
2. Osteogenique
   milieu de culture = dexamethasone, beta-glycérolphosphate, acide ascorbique, BMP, TGF beta
   coloration = Alizarine Red S

Question 14

rôle dexamethasone (corticoïde)

ex différenciation osseuse

Answer 14

induit expression de FdT spé Runx2, ostérix

induit ∑ de prot spé: BMP

Question 15

rôle acide ascorbique (Vit C) et beta-glycérolphosphate

ex différenciation osseuse

Answer 15

favorisent la ∑ de collagène de type I

Question 16

rôle TGF beta et BMP

ex différenciation osseuse

Answer 16

activent voie Runx2: favorisent ∑ ostéocalcine: ostéopontine

Question 17

impact différenciation

Answer 17

• modif morphologie
• modif du phénotype: comprend l’ensemble des marqueurs mb ou intracell exprimés par la cellule
• modif du profil d’expression génique: évolution des FdT
• modif facteurs sécrétés

Question 18

modif profil d’expression génique adipocytes et ostéocytes

Answer 18

CSM → adipocytes FdT: PPAR gamma

CSM → ostéocytes FdT: RUNX2/ Osterix

Question 19

RUNX2

Answer 19

impliqué dans la maturation des ostéoblastes

contrôle de la maturation des ostéoblastes et maturation en ostéocytes

Question 20

Ostérix

Answer 20

rôle dans l’orientation vers la lignée ostéoblastique

Question 21

facteurs sécrétés par CSM

Answer 21

FGF, TGF-beta
IL10, IL6
prostaglandines
métalloprotéases

Question 22

facteurs sécrétés par ostéocytes

Answer 22

TGF beta
IL6, IL-11
PTH
1,25 Vit D
TNF

Question 23

facteurs sécrétés par adipocytes

Answer 23

IGF, FGF, EGF
cytokines
prostaglandines
retinol, leptine, oestrogènes
TNF

Question 24

pour induire différenciation in vitro → choix bon additifs de culture

Answer 24

• fixation sur des R cellulaire
• induction d’une voie de signalisation
• ∑ d’un FdT
• activation gènes et ∑ des prot caractéristiques de la cellule que l’on souhaite obtenir

Question 25

pour induire différenciation in vitro → tenir compte de l'environnement natif de la cellule que l'on souhaite obtenir

Answer 25

culture en 2D ou 3D dureté du support contraintes mécaniques

Question 26

dureté du support pour l'adipocyte

Answer 26

10-50 Pa

Question 27

dureté du support pour le neurone

Answer 27

0,1-1 kPa

Question 28

dureté du support pour le myocyte

Answer 28

8-17 kPa

Question 29

dureté du support pour l'ostéocyte

Answer 29

25-40 kPa

Question 30

matrice peu élastique

Answer 30

forces nécessaires pour rompre l'adhésion à la matrice sont élevée augmentation de myosine et actine formation de PF → différenciation osseuse

Question 31

matrice élastique

Answer 31

forces nécessaires pour rompre l'adhésion à la matrice sont faibles internalisation de R nécessaire à la différenciation osseuse → différenciation en cellules nerveuses

Question 32

le flux sur la différenciation

Answer 32

augmente activité et viabilité des ostéoblastes

Question 33

la compression sur la différenciation

Answer 33

accroit le dépôt de matrice minéralisée

Question 34

la pression hydrostatique sur la différenciation

Answer 34

accroit la différenciation chondrogénique des CSM

Question 35

la tension sur la différentiation

Answer 35

accroit la prolifération et fabrication de fibres de collagènes par les fibroblastes du tendon